飼料中氯霉素的測(cè)定（農(nóng)業(yè)部2438號(hào)公告-8-2016）

一、適用范圍

適用飼料中氯霉素的測(cè)定（本實(shí)驗(yàn)采用復(fù)合飼料為樣品）

參考標(biāo)準(zhǔn)：《農(nóng)業(yè)部2438號(hào)公告-8-2016 飼料中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》

二、提取步驟

1）稱取5g樣品于50mL離心管中，加入20mL乙酸乙酯，渦旋混勻，超聲10min，離心8000r/min（10min），取上清液于雞心瓶中；再用20mL乙酸乙酯分兩次重復(fù)提取，合并上清液，加入0.5mL氨水，混勻，于45℃水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干。

2）加入1.5mL甲醇，混勻，再加入3.5mL4%氯化鈉溶液溶解，轉(zhuǎn)移至15mL離心管中，加入5mL正己烷振蕩，離心6000r/min（10min），去除正己烷層；再加入5mL正己烷重復(fù)操作，后加入0.5mL氨水，混勻，待凈化。

三、SPE凈化步驟

SPE柱：月旭Welchrom® BRP 規(guī)格：60mg/3mL；

活   化：3mL 甲醇、3mL 水，棄去；

上  樣：待凈化液 全部上樣，控制流速，不宜過(guò)快，棄去；

淋  洗：2mL水，1mL甲醇-乙腈-水-氨水溶液，棄去，并抽干小柱；

洗   脫：3mL5%氨化甲醇洗脫，抽干。

45℃水浴氮?dú)獯蹈?，?0%甲醇水定容至1mL，過(guò)0.22μm有機(jī)濾頭，待上機(jī)。

四、色譜條件

色譜柱：月旭Ultimate® XB-C18 ,4.6*250mm,5μm；

流動(dòng)相：甲醇-水（40-60）；

流   速：1.0mL/min；

柱   溫：30℃；

進(jìn)樣量：20μL；

檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm。

五、色譜圖或者加標(biāo)回收率結(jié)果

六、相關(guān)產(chǎn)品信息